生育健康不良结局模型构建平台可以实现生育健康不良结局表型的体内和体外模型构建及相关分子机制研究。体内模型构建包括动物整体染毒及基因工程编辑建模；体外模型构建包括在细胞及类器官水平上进行化学诱导及基因干预建模。平台设施包括基础实验平台、细胞/胚胎培养间和分子生物学实验室，拥有倒置荧光显微镜、蛋白质电泳和印迹设备、凝胶成像系统、实时荧光定量PCR仪等相关仪器设备，能够支持动物模型构建、细胞和类器官培养、DNA/RNA/蛋白质分析及分子标志物检测等。此外，平台还可结合多组学分析，从“人群-动物-细胞”多层次解析遗传、表观遗传及环境因素在生育健康不良结局中的作用机制。

凝胶成像系统	荧光倒置显微镜	酶标仪	荧光定量PCR仪

实验室运用体内和体外模型开展了多项应用案例研究，在探讨疾病基因-环境交互作用与出生缺陷及相关分子机制的研究领域取得一系列成果，其中代表性工作如下：（1）应用体内染毒构建污染物致唇腭裂及神经管缺陷疾病模型。实验室通过前期的探索与实践，成功构建多种环境暴露污染物致畸模型，包括多种重金属及有机污染物暴露可导致胎鼠出现唇腭裂及神经管缺陷表型，相关研究论文已在Clinical Epigenetics、Science of the Total Environment、Free Radical Biology and Medicine等SCI期刊上。（2）应用利用体外全胚胎培养构建污染物致神经管缺陷疾病模型。结合人群甲基化芯片数据，在苯并（a）芘暴露的体外小鼠全胚胎培养模型中发现NTD发生率增加及Casp8低甲基化、表达上调和过度凋亡。相关研究结果发表在Clinical Epigenetics期刊上。（3）利用CRISPR/Cas9技术构建基因突变致神经管缺陷疾病模型。基于前期的人群研究发现了MED12基因的体细胞变异p.Arg1782Cys，利用CRISPR/Cas9技术在小鼠模型中进行功能性研究，发现MED12基因的功能变异可导致神经管缺陷发生。相关研究结果发表在Human Genetics 期刊上。（4）基于胚胎干细胞或诱导多能干细胞的神经管类器官模型，并利用基因编辑技术在细胞水平上进行基因功能研究。结合人群全基因组测序和靶向测序，我们发现脊柱裂病例中罕见有害RAD9B变异显著富集。然后发现在人类胚胎干细胞中敲除RAD9B后影响了PAX6和OCT4表达，深刻影响了早期分化并阻碍了体外神经管类器官的形成。相关研究结果发表在Human Mutation 期刊上。

整合人群结果、动物实验及细胞模型的数据结果，针对疾病基因-环境互作机制的研究痛点、打通多层次多组学数据的分析路径，申请人牵头构建了“人群-动物-细胞”多层次研究平台，包含模型构建、样本采集、影像学观察、分子标志物检测和数据分析等部分。目前已经有效支撑了多项研究工作[Sci Total Environ. 2021;764:144245；Free Radic Biol Med. 2018;116:149-158； Front Cell Dev Biol. 2021;9:641831；Epigenetics, 2022,17(2):133-146；Human Genetics, 2020,139(10):1299-1314；Human mutation, 41(4), 786–799；Clinical Epigenetics, 2019,11(1):13]。

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